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生物试剂优选白介素10(IL-10)ELISA试剂盒精准测样

更新时间:2026-03-27      点击次数:107
 在生命科学研究领域,白介素10(IL-10)作为一种多功能负性调节细胞因子,主要由Th2细胞、活化的B细胞、单核细胞和巨噬细胞产生,兼具强效抗炎与免疫调节功能,是炎症反应与免疫耐受调控的核心分子,深度参与肿瘤发生发展、感染性疾病进程、自身免疫病发病机制等多个生理病理过程,其浓度变化已成为相关研究的关键检测指标。Elabscience®凭借深厚的研发积淀,推出的小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒,为小鼠生物样本检测设计,以严格的品质控制、优异的检测性能,成为科研人员开展小鼠IL-10相关研究的优选工具,为精准获取实验数据、推动研究进展提供可靠支撑。

一、试剂盒核心用途

本试剂盒专为体外定量检测Mouse(小鼠)血清、血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-10浓度而设计,可精准捕捉样本中IL-10的含量变化,适配小鼠相关的炎症、免疫、肿瘤等各类科研场景,为解析IL-10在小鼠模型中的调控机制、评估实验干预效果等提供精准的量化数据支撑,助力科研人员深入探索IL-10在生理病理过程中的作用——作为免疫系统中具代表性的负调控细胞因子,IL-10通过与其特异性受体复合物结合,激活相关信号转导,调控免疫细胞的分化、活化与效应功能,其表达异常与多种疾病密切相关。
 

 

二、检测原理解析

本试剂盒采用经典且成熟的双抗体夹心ELISA法,该方法特异性强、灵敏度高,是细胞因子定量检测的金标准,其核心原理基于抗原与抗体的特异性结合及生物素-亲和素的高效偶联作用,具体流程科学严谨,确保检测数据可靠,步骤如下:
  1. 包被与结合:将抗小鼠IL-10抗体预先包被于酶标板上,实验时加入样品或标准品,其中的小鼠IL-10会与包被抗体特异性结合,随后通过洗涤去除未结合的游离成分,避免干扰检测结果。
  2. 免疫复合物形成:依次加入生物素化的抗小鼠IL-10抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,生物素化抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-10特异性结合,同时生物素与亲和素发生特异性结合,形成稳定的免疫复合物,再次洗涤去除游离成分,进一步提升检测特异性。
  3. 显色与定量:加入显色底物(TMB),TMB在HRP的催化下呈现蓝色,加入终止液后反应终止,溶液变为黄色。使用酶标仪在450nm波长处测定OD值,IL-10浓度与OD450值呈正相关,通过绘制标准曲线即可精准计算出样品中IL-10的具体浓度。

三、核心性能参数

试剂盒的检测性能直接决定实验结果的可靠性,本产品经过严格优化与质检,各项参数均达到科研级标准,适配小鼠样本的检测需求,具体如下:
参数名称
具体规格/性能
反应类型
夹心法
规格
96T
反应时间
3.5h,全程操作高效,大幅提升实验效率
反应性
Mouse(仅针对小鼠源样本检测,适配小鼠各类生物体液)
检测方法
Colormetric(比色法),操作简便,无需复杂检测设备
检测范围
15.63—1000 pg/mL,覆盖小鼠样本中IL-10的常规浓度范围,可满足不同实验场景需求
灵敏度
9.38 pg/mL,具备较高灵敏度,可精准检测低浓度样本中的IL-10,适用于微量检测场景
样本体积
100μL,样本用量少,可减少珍贵小鼠样本的损耗
样本类型
血清、血浆或其他生物体液,适用范围广泛,适配多种小鼠样本处理方式
特异性
可特异性检测样本中的小鼠IL-10,与其他相关蛋白无明显交叉反应,有效避免干扰,确保检测结果精准专一
重复性
板内、板间变异系数均<10%,远低于行业常规标准,实验重复性优异,可有效减少实验误差,保障数据一致性

四、典型数据与精密度验证

(一)典型标准曲线数据

需注意,由于实验操作条件的差异(如操作者技能、移液精度、洗板技术及温育条件等),标准曲线的OD值会有所不同,以下数据仅供参考,实验者需根据自身实验条件建立标准曲线:
IL-10浓度 (pg/mL)
OD值1
OD值2
Average(平均值)
Corrected(校正值)
1000
2.414
2.448
2.431
2.366
500
1.623
1.625
1.624
1.559
250
0.940
0.904
0.923
0.858
125
0.428
0.448
0.438
0.373
62.5
0.269
0.251
0.26
0.195
31.25
0.167
0.165
0.166
0.101
15.63
0.11
0.124
0.117
0.052
0
0.062
0.068
0.065
--

(二)精密度验证

精密度是评估试剂盒稳定性的核心指标,本试剂盒通过板内、板间双重验证,确保检测结果的一致性和可靠性,具体验证方案及结果如下:
  1. 板内精密度:选取低、中、高三种浓度的小鼠样本,在同一块酶标板上分别检测20次,计算变异系数(CV%);
  2. 板间精密度:选取低、中、高三种浓度的小鼠样本,在3块不同的酶标板上分别检测20次,计算变异系数(CV%)。
Intra-assay Precision(板内精密度)
Inter-assay Precision(板间精密度)
Sample(样本)
n(检测次数)
Mean (pg/mL)(平均值)
CV (%)(变异系数)
Sample(样本)
n(检测次数)
CV (%)(变异系数)
1(低浓度)
20
51.00
5.29
1(低浓度)
20
6.77
2(中浓度)
20
125.60
4.78
2(中浓度)
20
5.11
3(高浓度)
20
414.80
2.99
3(高浓度)
20
4.60
验证结果显示,板内、板间变异系数均<10%,其中板内高浓度样本变异系数仅为2.99%,板间高浓度样本变异系数为4.60%,远优于行业标准,充分证明试剂盒稳定性优异,可有效保障实验数据的可靠性和重复性,为科研结论提供有力支撑。

五、回收率与线性验证

(一)回收率验证

回收率是评估试剂盒准确性的关键指标,用于判断小鼠样本基质对检测结果的干扰程度,理想回收率范围为80%-120%,越接近100%说明准确性越高。本试剂盒通过向5个不同小鼠样本中添加已知浓度的IL-10目标蛋白,进行回收实验,具体结果如下:
Sample Type(样本类型)
Range (%)(回收率范围)
Average Recovery (%)(平均回收率)
Serum (n=8)(小鼠血清)
96-108
102
EDTA plasma (n=8)(小鼠EDTA血浆)
88-102
94
Cell culture media (n=8)(小鼠细胞培养液)
86-97
92
实验结果表明,三种常见小鼠样本类型的回收率均在理想范围内,平均回收率最高达102%,说明小鼠样本基质对检测结果的干扰极小,试剂盒准确性优异,可精准反映样本中IL-10的真实浓度,避免因基质干扰导致的实验误差。

(二)线性验证

线性验证用于评估试剂盒对不同稀释倍数样本的检测适用性,确保样本稀释后仍能精准检测IL-10浓度,实验方案为:将5个小鼠样本分别稀释2倍、4倍、8倍、16倍,进行回收实验,得出回收率范围及平均回收率,具体结果如下:
稀释倍数
检测指标
Serum (n=5)(小鼠血清)
EDTA plasma (n=5)(小鼠EDTA血浆)
Cell culture media (n=5)(小鼠细胞培养液)
1:2
Range (%)(回收率范围)
87-98
96-111
90-102
Average (%)(平均回收率)
93
102
95
1:4
Range (%)(回收率范围)
95-111
82-94
95-109
Average (%)(平均回收率)
102
88
101
1:8
Range (%)(回收率范围)
98-116
82-95
92-104
Average (%)(平均回收率)
106
89
98
1:16
Range (%)(回收率范围)
102-117
85-97
98-112
Average (%)(平均回收率)
108
91
104
线性验证结果显示,小鼠血清、EDTA血浆、细胞培养液在1:2至1:16的稀释范围内,回收率均保持在82%-117%的理想区间,平均回收率在88%-108%之间,说明试剂盒对不同稀释倍数的小鼠样本均有良好的适配性,可满足高浓度样本稀释后的精准检测需求,进一步扩大了试剂盒的应用场景。

六、试剂盒组成及保存条件

(一)试剂盒组成

本试剂盒包含实验所需全部核心试剂,无需额外自行配制关键组分,开箱即可使用,大幅简化实验流程,具体组成如下:
中文名称
英文名称
规格
保存条件
ELISA酶标板(可拆卸)
Micro ELISA Plate(Dismountable)
8 孔×12 条
-20℃,可存放6个月
冻干标准品
Reference Standard
2 支
-20℃(避光),可存放6个月
浓缩生物素化抗体(100×)
Concentrated Biotinylated Detection Ab
1支 120 μL
-20℃(避光),可存放6个月
浓缩HRP酶结合物(100×)
Concentrated HRP Conjugate
1支 120 μL
-20℃(避光),可存放6个月
标准品&样品稀释液
Reference Standard & Sample Diluent
1瓶 20 mL
2-8℃,可存放6个月
生物素化抗体稀释液
Biotinylated Detection Ab Diluent
1瓶 14 mL
2-8℃,可存放6个月
酶结合物稀释液
HRP Conjugate Diluent
1瓶 14 mL
2-8℃,可存放6个月
浓缩洗涤液(25×)
Concentrated Wash Buffer (25×)
1瓶 30 mL
2-8℃,可存放6个月
底物溶液(TMB)
Substrate Reagent
1瓶 10 mL
2-8℃(避光),可存放6个月
反应终止液
Stop Solution
1瓶 10 mL
2-8℃,可存放6个月
封板覆膜
Plate Sealer
5 张
常温保存
产品说明书
Product Description
1 份
常温保存
质检报告
Certificate of Analysis
1 份
常温保存

(二)保存注意事项

  1. 未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;若一周后使用,需拆开试剂盒,按照上述表格中的条件分别保存各组分,避免试剂失效。
  2. 所有试剂瓶盖须旋紧,防止试剂蒸发和微生物污染,影响检测性能,确保试剂稳定性。
  3. 试剂体积以实际发货版说明书为准,相关试剂在分装时会比标签标明的体积稍多,使用时需量取,不可直接倒出,避免试剂浪费和用量不准确,保障实验一致性。
  4. 需避光保存的试剂(如浓缩HRP酶结合物、冻干标准品、底物溶液TMB)需严格避光存放,防止试剂降解失效。

七、实验所需自备物品

为确保实验顺利开展,除试剂盒自带组分外,实验者需自备以下物品,适配小鼠样本检测的实验需求:
  1. 酶标仪:需配备450nm波长滤光片,用于OD值的精准测定;
  2. 高精度移液器及配套耗材:包括0.5-10 μL、2-20 μL、20-200 μL、200-1000 μL规格的高精度移液器,以及EP管、一次性吸头,确保移液精准,减少实验误差;
  3. 恒温设备及纯水:37℃恒温箱(用于实验温育,保障反应充分进行),双蒸水或去离子水(用于试剂稀释、洗板等操作);
  4. 吸水纸:用于洗板后吸干酶标板孔内残留液体,避免残留液体影响检测结果的准确性。

八、产品优势总结

小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒依托专业的研发技术和严格的质检流程,聚焦小鼠样本检测需求,核心优势突出,成为科研人员的优选试剂,具体优势如下:
  1. 精准可靠:采用双抗体夹心ELISA法,特异性强,可精准检测小鼠IL-10,与其他相关蛋白无交叉反应;灵敏度达9.38 pg/mL,板内板间重复性优异,回收率、线性验证均达标,可精准反映小鼠样本中IL-10的真实浓度,契合IL-10作为疾病相关生物标志物的检测需求,助力科研人员获取可靠实验数据。
  2. 适配性强:检测范围覆盖15.63—1000 pg/mL,可适配小鼠血清、血浆、细胞培养液等多种生物体液,且对1:2至1:16稀释的样本均有良好检测效果,适配不同实验场景,满足多样化科研需求。
  3. 便捷高效:试剂盒组分齐全,开箱即可使用,无需自行配制核心试剂;样本用量仅100μL,反应时间仅3.5h,操作流程清晰,无需复杂技术储备,大幅提升实验效率,节省科研时间。
  4. 品质保障:经严格质量控制,试剂稳定性强,各组分保存条件明确,可长期存放(-20℃条件下可存放6个月),不同批次间性能一致性好,有效降低实验成本和试剂浪费,保障实验结果的稳定性。
在小鼠炎症、免疫、肿瘤等领域的科研探索中,精准的IL-10检测数据是解析疾病机制、评估实验效果的关键。Elabscience®小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒以优异的检测性能、便捷的操作设计,适配小鼠各类生物样本的检测需求,为科研人员开展相关研究提供精准、可靠的核心支撑。
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