白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒是科研领域专门用于定量检测生物样本中IL-1β浓度的核心工具,仅可用于科研场景,不能用于临床诊断。
一、关键操作要点
前期准备:试剂盒和样本提前1小时在25-28℃室温平衡,剩余未使用的板条密封后放回4℃保存,所有试剂组分提前按说明书配制成工作液。
加样温育:标准品孔、样本孔分别加对应液体50μL,除空白孔外每孔加HRP标记检测抗体100μL,封板后37℃避光孵育60min,加样时间尽量控制在5分钟内。
洗板显色:弃液拍干后用洗涤液重复洗板5次,每次静置20s,洗板后立即拍干残留液体,不要让微孔板干燥;每孔加100μL底物混合液,37℃避光孵育15-30min。
终止读数:每孔加终止液50μL,15min内用酶标仪在450nm波长下测定各孔OD值,通过标准曲线计算样本浓度。
二、白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒核心使用注意事项
样本处理:溶血样本不可用于检测,样本需避免反复冻融,短期4℃可保存1周,长期需分装冻存于-20℃以下;若样本浓度超出标准曲线上限,需提前做预实验确定稀释倍数后再复测。
试剂管理:试剂盒需2℃-8℃避光保存,不同厂家、不同批号的试剂盒组分严禁混用,过期产品禁止使用,浓洗涤液出现结晶时可37℃水浴助溶后再稀释使用。
实验质控:移液器需定期校准,吸头、试管等耗材一次性使用避免交叉污染;全程尽量由同一操作人员完成,严格控制室温、孵育温度等实验条件,批内CV需控制在8%以内,批间CV控制在10%以内。
合规要求:该试剂盒仅可用于科研用途,绝对不能用于临床诊断,检测废弃物需按传染物规范处理。