一、内容概要
Elabscience 推出未包被人肿瘤坏死因子β(TNF-β) elisa试剂盒(货号:E-UNEL-H0389),采用双抗体夹心检测模式,面向具备成熟 ELISA 实验操作经验的科研人员,支持自主优化全套实验条件,可体外定量检测人血清、血浆及各类生物体液中的 TNF-β 浓度。试剂盒提供两种主流规格,配套完整 ELISA 核心实验组分,检测区间 15.63–1000 pg/mL,灵敏度可达 3.81 pg/mL,检测重复性、样本回收率表现稳定,适配肿瘤免疫、自身免疫病、炎症机制、新药药效评价等多方向科研项目,兼顾实验灵活性与长期使用成本控制。
二、TNF-β 研究背景介绍
肿瘤坏死因子 β(TNF-β,又称淋巴毒素 LTA)是 TNF 超家族关键淋巴因子,主要由活化 T、B 淋巴细胞分泌,通过 TNFR1、TNFR2 受体介导多条信号通路,同步参与免疫稳态、慢性炎症、细胞凋亡、淋巴器官发育等多重生理病理过程。
自身免疫疾病:类风湿关节炎、系统性红斑狼疮患者外周体液 TNF-β 表达显著上调,协同 TNF-α 促进滑膜增生、自身抗体生成,介导骨关节与多脏器损伤,是评估炎症活动度的重要标志物;
肿瘤微环境:TNF-β 具备双向调控效应,既可直接诱导肿瘤细胞凋亡发挥抑癌作用,也可通过激活 NF-κB 通路促进肿瘤血管新生、肿瘤细胞侵袭转移,是肿瘤转移、免疫逃逸机制研究核心靶点;
感染与慢性炎症:细菌、病毒感染引发的全身炎症反应中,TNF-β 同步释放,参与急性期免疫应答,可用于区分感染轻重程度;
药物研发:靶向 TNF 通路抗炎、抗肿瘤候选药物研发中,体液 TNF-β 定量是药效评价、剂量筛选的核心检测指标。
传统预包被试剂盒实验流程固定,难以适配个性化条件摸索;而本款未包被试剂盒开放全部实验参数,便于研究者建立专属标准化检测方案,为 TNF-β 相关机制研究提供稳定检测工具。
三、产品基础信息介绍
四、检测原理
未包被人肿瘤坏死因子β(TNF-β) elisa试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法完成定量检测,完整反应流程如下:
实验人员使用试剂盒内捕获抗体自行包被酶标板,低温孵育过夜后封闭非特异性结合位点;
向孔内加入梯度标准品或待测生物样本,样本中 TNF-β 抗原与固相捕获抗体特异性结合;
洗去未结合杂质后,加入生物素化抗人 TNF-β 检测抗体,形成 “捕获抗体 - TNF-β- 生物素标记检测抗体" 免疫复合物;
加入 HRP 标记亲和素,依靠生物素 - 亲和素特异性结合连接酶标记物,再次洗板去除游离酶结合物;
加入 TMB 显色底物,在 HRP 催化下底物呈蓝色,室温 37℃避光孵育 15 min;
终止液终止显色反应,溶液转为黄色;酶标仪 450 nm 波长读取各孔 OD 值;
TNF-β 浓度与 OD450 数值呈正向线性相关,通过标准曲线拟合计算样本内 TNF-β 精确含量。
五、标准化操作步骤
包被:每孔添加 100 μL 捕获抗体工作液,2–8℃孵育过夜;弃液后加入 200 μL 封闭液,37℃封闭 60 min;
抗原结合:甩干封闭液,每孔加入 100 μL 标准品或待测样本,37℃孵育 90 min;
一抗结合:弃液后直接加入 100 μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育 60 min;
洗板:弃液,洗板 3 次;
酶结合:每孔 100 μL HRP 亲和素工作液,37℃孵育 30 min,弃液后洗板 5 次;
显色:每孔 90 μL TMB 底物,37℃避光反应 15 min;
终止读数:加入 50 μL 终止液混匀,即刻 450 nm 测定 OD 值,绘制标准曲线计算样本浓度。
六、核心应用领域
1. 基础免疫学研究
T/B 淋巴细胞活化分化、淋巴器官发育、免疫耐受调控、固有免疫与适应性免疫交互机制探究,定量细胞上清、外周体液 TNF-β 表达水平。
2. 肿瘤免疫与转移机制
乳腺癌、肺癌、肝癌等实体瘤微环境研究,分析 TNF-β 调控肿瘤骨转移、免疫逃逸、肿瘤细胞凋亡的分子通路;临床肿瘤患者血清标志物筛查、预后相关性分析。
3. 自身免疫与炎症疾病
类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征、慢性肠炎等模型动物 / 临床样本检测,监测疾病炎症活动度,探究 TNF-β 作为炎症靶点的作用通路。
4. 抗感染免疫研究
细菌、病毒慢性感染模型,检测感染进程中 TNF-β 动态表达,评估机体抗感染免疫应答强度。
5. 新药研发与药效评价
抗炎、抗肿瘤、免疫调节候选药物体外细胞实验、体内动物药效验证;生物制剂靶向 TNF 通路的剂量梯度、给药周期效果监测。
6. 临床生物标志物探索
大批次临床血清、血浆样本队列筛查,挖掘 TNF-β 在肿瘤、自身免疫病中的诊断、预后辅助参考指标。
七、产品核心优势
1. 实验自由度高,支持体系自主优化
未预包被设计,全套核心抗体、底物、标准品独立提供,科研人员可自主调整包被抗体浓度、孵育时长、封闭条件、洗板次数等参数,适配个性化实验方案,不受成品试剂盒固定流程限制,适合方法学摸索、条件优化类课题。
2. 长期使用成本可控,适配高通量实验
相比预包被成品试剂盒,无预制酶标板附加成本,分 5 板、15 板两种批量规格,长期高频次检测可降低单次实验耗材支出,适合实验室长期开展 TNF-β 批量检测。
3. 检测性能稳定,低丰度样本可检出
灵敏度 3.81 pg/mL,检测下限低,可捕捉体液中低表达 TNF-β;15.63–1000 pg/mL 宽线性区间,减少样本反复稀释操作;板内、板间 CV<10%,加标回收率 80%–120%,数据重复性、基质兼容性表现平稳。
4. 特异性良好,减少结果干扰
配对特异性抗人 TNF-β 双抗体系,与 TNF-α、IL 家族等同源促炎因子无明显交叉反应,降低非特异性显色带来的数据偏差。
5. 样本兼容广泛,操作门槛友好
血清、血浆、细胞上清、脑脊液等多种生物体液均可直接检测;采用通用 TMB 比色法,常规实验室酶标仪即可完成读数,配套完整操作流程,具备基础 ELISA 操作经验即可上手。
6. 配套体系完shan,实验一站式配齐
可搭配同品牌 ELISA 辅助组分试剂盒,统一封闭液、浓缩洗涤液、稀释液等通用试剂,试剂匹配度高,减少不同品牌试剂混用带来的实验误差。
总结
Elabscience 未包被人肿瘤坏死因子β(TNF-β) elisa试剂盒,面向有自主搭建 ELISA 实验需求的资深科研人员,依托成熟双抗体夹心检测体系,兼顾实验灵活度、检测精准度、长期使用性价比三大核心需求。试剂盒灵敏度、线性范围、重复性、特异性等质控指标满足肿瘤免疫、自身免疫炎症、抗感染、新药研发等多方向科研标准,适配血清、血浆等多种临床与细胞样本。