活死细胞双染试剂盒是细胞生物学、药物研发领域的核心荧光染色耗材,通过特异性双荧光标记技术,可同时精准区分活细胞与死细胞,广泛应用于细胞活性检测、药物毒性评估、细胞制剂质控等科研场景,严禁直接用于临床诊断或治疗。
活死细胞双染试剂盒需按组分分类精准存储,核心原则是避光、密封、控温、避免反复冻融,才能*大程度延长试剂有效期,保证染色结果稳定准确。
核心组分分类保存要求
Calcein-AM、PI等荧光染料母液:必须在-20℃避光、干燥、密封环境下存放,严禁反复冻融,否则会导致染料水解失效,荧光信号大幅衰减 。
10×染色缓冲液:常规可在-20℃保存,若日常使用频繁,可转移至2~8℃环境存放,避免反复冻融影响缓冲体系稳定性 。
AO/PI类特殊双染试剂盒:整体需全程-20℃避光密封保存,不可放置在4℃环境,其有效期仅为6个月,远短于常规Calcein-AM/PI试剂盒的12个月有效期 。
关键保存操作细节
收到试剂后立即分装:按照单次实验的实际用量,将染料母液分装成小体积无菌EP管,标注分装日期和试剂浓度,每次实验仅取出1管使用,从根源上减少开盖次数和反复冻融的概率,避免水汽进入试剂导致水解 。
使用前预处理:每次取出分装后的试剂管,先在4℃环境下缓慢解冻,开盖前短暂离心,将管壁、管盖上的残留液体离心至管底,避免试剂洒落损失,同时防止开盖时引入外界水汽 。
染色工作液现配现用:提前配制的混合染色工作液稳定性极差,必须在实验当天按需配制,且配完后1小时内使用完毕,绝对不能留存到次日继续使用,否则会出现严重的非特异性染色、背景荧光飙升的问题 。
长期保存避坑要点
存放试剂的冰箱需保持温度稳定,避免频繁开关门导致温度大幅波动,同时在试剂盒内放入少量干燥剂,防止环境水汽进入试剂管内。
严禁将荧光染料组分放置在室温或4℃环境长期存放,哪怕是短时间的室温放置,也会大幅加速Calcein-AM的水解,直接导致后续活细胞绿色荧光信号消失。
试剂全程避光存放,所有分装后的试剂管都要用铝箔纸包裹,避免长期被灯光、日光直射,防止荧光染料发生光淬灭,失去标记能力 。