详细介绍
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | E-EL-M0690c |
|---|---|---|---|
| 规格 | 96T | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 科研 | 应用领域 | 生物产业 |
该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IgA浓度。
检测原理:
小鼠免疫球蛋白A(IgA)酶本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IgA抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IgA会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IgA抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IgA抗体与结合在包被抗体上的小鼠IgA结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IgA浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IgA的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Mouse |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 6.25—400 ng/mL |
| 灵敏度 | 3.75 ng/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
特异性
可检测样本中的小鼠IgA,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (ng/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 400 | 2.322 2.368 | 2.345 | 2.255 |
| 200 | 1.706 1.73 | 1.718 | 1.628 |
| 100 | 0.938 0.93 | 0.935 | 0.845 |
| 50 | 0.5 0.538 | 0.519 | 0.429 |
| 25 | 0.276 0.258 | 0.267 | 0.177 |
| 12.5 | 0.194 0.188 | 0.191 | 0.101 |
| 6.25 | 0.136 0.148 | 0.142 | 0.052 |
| 0 | 0.085 0.093 | 0.09 | -- |
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精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (ng/mL) | 20.95 | 52.87 | 156.46 | 20.01 | 53.52 | 164.75 |
| Standard deviation | 1.44 | 2.29 | 8.53 | 1.08 | 3.18 | 7.51 |
| C V (%) | 6.87 | 4.33 | 5.45 | 5.40 | 5.94 | 4.56 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 93-106 | 99 |
| EDTA plasma (n=8) | 87-99 | 93 |
| Cell culture media (n=8) | 93-110 | 101 |
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