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当前位置:首页 > 产品中心 > ELISA试剂盒 > Human > E-EL-0046c多巴胺(DA)酶联免疫吸附测定试剂盒
多巴胺(DA)酶联免疫吸附测定试剂盒

简要描述:Elabscience®经过11年的专注研发,可为您的生物学研究提供覆盖人、小鼠、大鼠、兔、猴、通用等反应性物种,1300多种高品质的ELISA试剂盒。我们的ELISA产品经过严格的原料-半成品-成品三步质检,确保体系稳定,线性范围好,特异性和灵敏度高。产品应用广泛,涉及癌症&肿瘤、免疫学、心血管、干细胞、神经学、微生物学、细胞生物学、新陈代谢、信号传导、表观遗传学&核信号等10多个热门研究领域。

  • 产品型号:E-EL-0046c
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2022-05-20
  • 访  问  量:304

详细介绍

品牌其他品牌货号E-EL-0046c
规格96T供货周期现货
主要用途科研应用领域生物产业

用途

该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然DA浓度。

检测原理

本试剂盒采用竞争ELISA法。用DA抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的DA与包被的DA竞争生物素标记的抗DA单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,DA浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中DA的浓度。

反应类型竞争法
规格96T
反应时间2.0h
反应性通用
检测方法Colormetric
检测范围31.25-2000 pg/mL
灵敏度18.75 pg/mL
样本体积50μL
样本类型血清、血浆或其他相关生物液体

特异性

可检测样本中的DA,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

重复性

板内,板间变异系数均<10%。

典型数据

由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

(pg/mL)O.DAverage
20000.342
0.372
0.357
10000.446
0.502
0.474
5000.687
0.657
0.672
2500.965
0.967
0.966
1251.325
1.319
1.322
62.51.674
1.654
1.664
31.251.922
1.928
1.925
02.281
2.295
2.288

精密度

板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

 Intra-assay PrecisionInter-assay Precision
Sample123123
n202020202020
Mean
(pg/mL)
93.20168.70786.2094.20159.90725.00
Standard
deviation
6.107.4029.105.309.0037.00
C V (%)6.554.393.705.635.635.10

回收率

分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

Sample TypeRange (%)Average Recovery (%)
Serum (n=8)95-110101
EDTA plasma (n=8)97-111102
Cell culture media (n=8)92-10398

试剂盒组成及保存

未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

中文名称英文名称规格保存条件
ELISA酶标板(可拆卸)Micro ELISA Plate(Dismountable)8 孔×12 条-20℃,可存放6个月
冻干标准品Reference Standard2支
浓缩生物素化抗体(100×)Concentrated Biotinylated Detection Ab1支 120 μL
浓缩HRP酶结合物(100×)Concentrated HRP Conjugate1支 120 μL-20℃(避光),可存放6个月
标准品&样品稀释液Reference Standard & Sample Diluent1瓶 20 mL2-8℃.可存放6个月
生物素化抗体稀释液Biotinylated Detection Ab Diluent1瓶 14 mL
酶结合物稀释液HRP Conjugate Diluent1瓶 14 mL
浓缩洗涤液(25×)Concentrated Wash Buffer (25×)1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)Substrate Reagent1瓶 10 mL2-8℃(避光)
反应终止液Stop Solution1瓶 10 mL2-8℃
封板覆膜Plate Sealer5 张
产品说明书Product Description1 份
质检报告Certificate of Analysis1 份

说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

试验所需自备物品

  • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)

  • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL

  • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水

  • 4.吸水纸

操作步骤

1. 对应板孔中加入50μL标准品工作液或样本后,立即每孔加入50μL生物素化抗体工作液,37℃孵育45分钟

2. 弃掉板内液体,洗板3次

3. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次

4. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右

5. 每孔加入50μL终止液

6. 立即在450nm波长下读数,处理数据


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