STYX™红色固定化细胞活力检测试剂盒 | 固定破膜后信号稳定

在多参数流式细胞术中，死细胞的非特异性染色是导致假阳性信号和数据变异的主要来源。尤其在涉及胞内细胞因子或核内转录因子检测时，固定和破膜操作会使死细胞碎片和抗体非特异性结合更为严重，直接影响稀有细胞亚群的准确鉴定。因此，在染色方案中纳入一款固定后信号不失真的活力染料，已成为高质量流式实验的质控标配。

Elabscience® STYX™红色固定化细胞活力检测试剂盒（货号：E-CK-A170） 提供了一种膜不通透、胺反应性的红色荧光染料，能够精准区分活/死细胞，且染色结果在固定、破膜及冻存后保持不变。其光谱特性专为PerCP检测通道设计，是构建多色流式方案（尤其是包含FITC、PE等常见荧光素）的理想死细胞排除工具。

技术原理：共价结合，死细胞信号显著增强

STYX™红色固定化细胞活力检测试剂盒 属于小分子胺反应性染料，无法穿透完整的细胞膜：

• 活细胞：染料仅能标记膜表面游离胺基，荧光强度较低。

• 死细胞/凋亡细胞：膜完整性破坏，染料进入胞内与大量蛋白质胺基共价结合，荧光强度较活细胞提升数倍至数十倍，在流式散点图上形成清晰分离的阳性群体。

该结合为不可逆共价键，因此后续的固定、破膜及冻存操作不会导致染料脱落，保证了活力门控的长期稳定性。

核心优势：固定/破膜前后信号高度一致

根据产品验证数据（见结果图），将热灭活与活C57BL/6小鼠脾细胞按1:1混合，经STYX™ Red染色后，一部分直接上机（蓝色峰），另一部分使用固定/破膜缓冲液处理后上机（红色峰）。结果显示：

• 固定/破膜前后，死细胞的强阳性峰和活细胞的弱阳性峰几乎wan全重叠，荧光分离度无显著变化。

• 未染色细胞（黑色虚线峰）背景清晰，表明染料具有优异的信噪比。

这一特性使得研究者可以灵活安排染色流程——既可在表面染色时加入，也可在固定破膜后（或细胞冻存复苏后）进行活力染色，无需担心后续处理削弱分辨能力。

光谱参数与仪器兼容性

STYX™ Red的激发峰约为522 nm，发射峰约为652 nm，适用于配备PerCP通道（通常为488 nm激发，670 nm长通或690/50带通接收）的流式细胞仪。其红色发射光谱与FITC（530 nm）、PE（575 nm）、APC（660 nm） 等常用荧光素重叠极小，非常适合于≥6色的多色方案，尤其当PerCP通道未被其他标记占用时，可作为高效的死活排除通道。

产品规格与储存条件

提供50 Tests、100 Tests及200 Tests三种规格，灵活匹配不同通量需求。请于 -20°C干燥避光条件下保存，有效期为12个月。运输使用冰袋，确保染料活性。建议shou次解冻后分装储存，避免反复冻融。

推荐应用场景

本试剂盒适用于小鼠、大鼠及人来源的各类单细胞悬液，包括：

• 外周血、脾脏、淋巴结及肿瘤浸润淋巴细胞

• 经刺激培养后的T细胞、NK细胞

• 需要进行胞内细胞因子（ICS） 或核内转录因子（如Foxp3） 染色的样本

• 冻存复苏后的细胞活力评估在实验设计中，可将STYX™ Red与表面抗体混合后一同加入细胞，孵育后洗涤，再进行后续固定破膜及胞内染色。上机分析时，圈定STYX™ Red阴性（或弱阳性）的细胞群，即可有效排除死细胞对目标信号的非特异性干扰。

如果您的流式方案已配置PerCP通道，且需要一种固定兼容、光谱洁净的死活染料，Elabscience STYX™红色固定化细胞活力检测试剂盒将帮助您获得更干净、更可信的流式数据，让每个阳性群体都反映真实的生物学状态。