黄色固定化细胞活力检测试剂盒—流式实验中死活细胞鉴定的“稳定之选”

在多色流式细胞术和细胞功能研究中，死细胞的存在是导致非特异性染色和假阳性信号的“头号干扰源"。死细胞由于膜通透性改变，会非特异性吸附抗体及其他荧光染料，造成背景升高、阳性群弥散，严重时甚至掩盖真实生物学差异。因此，在样本制备后有效剔除死细胞数据，是确保流式结果准确性的关键质控环节。

Elabscience® STYX™ 黄色固定化细胞活力检测试剂盒（货号：E-CK-A169） 提供了一款膜不通透、胺反应性的荧光染料，能够精准区分活细胞与死细胞，且信号在固定、破膜乃至冻存后依旧保持稳定，特别适用于需要胞内染色的复杂流式方案。

技术原理：基于胺反应性的死活区分机制

Elabscience® STYX™ 黄色固定化细胞活力检测试剂盒 是一种不能穿透完整细胞膜的小分子荧光染料。它能够与细胞表面及胞内游离胺基发生不可逆的共价结合：

• 活细胞：染料仅能标记细胞膜表面的胺基，荧光信号相对较弱。

• 死细胞或凋亡晚期细胞：细胞膜完整性丧失，染料得以进入细胞内部，与大量胞内蛋白的胺基结合，荧光强度显著高于活细胞（通常高出一个数量级）。

这一“信号增益型"设计使得活/死细胞群体在流式散点图上形成极为清晰的分离，无需复杂的计算即可准确圈定分析门。

核心优势：固定、破膜、冻存后信号依旧稳定

传统死活染料（如PI、7-AAD）需在染色后立即上机检测，一旦进行固定或破膜处理，其结合物会从死细胞上解离，导致假阴性结果。而STYX™ Yellow染料与胺基形成共价键，结合后极其牢固。根据产品验证数据（见结果图）：

• 将热灭活（死）与活C57BL/6小鼠脾细胞按1:1混合，使用STYX™ Yellow染色后，一部分样本立即上机检测（蓝色峰），另一部分样本经固定/破膜处理后再检测（红色峰）。

• 结果显示：固定/破膜前后，活细胞与死细胞的荧光强度差异几乎一致，死细胞始终保持在强阳性区域（红色峰与蓝色峰高度重叠），而未被染色的细胞（黑色虚线峰）背景极低。

这意味着您可以在实验流程的任意环节（表面染色前、固定破膜后、甚至是冻存复苏后）添加活力染料，为实验设计提供了极大的灵活性。

流式检测参数与仪器兼容性

STYX™ Yellow的激发峰约为402 nm，发射峰约为548 nm，可使用流式细胞仪的AmCyan检测通道（或对应488 nm激发、525/50 nm接收通道）进行采集。其光谱特性与FITC、PE等常用荧光素重叠极小，非常适合整合入多色（≥8色） 流式方案中，无需占用稀缺的检测通道资源。

产品规格与储存条件

为适配不同规模的实验需求，提供50 Tests、100 Tests及200 Tests三种规格。储存条件为 -20°C干燥避光保存，有效期为12个月。运输全程采用冰袋，确保染料活性。请避免反复冻融，建议shou次解冻后分装保存。

推荐应用场景

本试剂盒适用于小鼠、大鼠、人来源的多种样本类型，包括但不限于：

• 外周血、脾脏、淋巴结及肿瘤组织的单细胞悬液

• 经体外刺激培养后的T细胞、NK细胞

• 需要进行胞内细胞因子染色（ICS） 或核内转录因子（如Foxp3）染色的样本

• 长期冻存后复苏的细胞活力回溯检测

在进行流式上机前，于表面抗体染色孵育的同时加入STYX™ Yellow染料，即可在后续数据分析中轻松排除死细胞干扰，获得更干净、更可信的流式数据。

如果您的实验中死细胞比例较高，或正在构建包含胞内染色的多色流式方案，Elabscience STYX™ 黄色固定化细胞活力检测试剂盒将帮助您有效排除死细胞带来的假阳性困扰，让每一个阳性信号都来自真实的生物学差异。