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详细介绍
| 品牌 | Elabscience/伊莱瑞特 | 货号 | E-EL-M0043 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 96T | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 科研 | 应用领域 | 生物产业 |
该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-4浓度.
检测原理:
小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-4抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的小鼠IL-4会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-4抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-4抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-4结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，IL-4浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中IL-4的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Mouse |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 31.25—2000 pg/mL |
| 灵敏度 | 18.75 pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清，血浆或其他生物体液 |
特异性
可检测样本中的小鼠IL-4，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 2000 | 2.529 2.571 | 2.55 | 2.485 |
| 1000 | 1.569 1.621 | 1.595 | 1.53 |
| 500 | 1.005 0.971 | 0.988 | 0.923 |
| 250 | 0.432 0.47 | 0.451 | 0.386 |
| 125 | 0.244 0.24 | 0.242 | 0.177 |
| 62.5 | 0.181 0.153 | 0.167 | 0.102 |
| 31.25 | 0.116 0.118 | 0.117 | 0.052 |
| 0 | 0.06 0.070 | 0.065 | -- |
 |
精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) | 97.60 | 252.20 | 947.10 | 99.90 | 274.50 | 966.50 |
| Standard deviation | 6.50 | 11.30 | 30.30 | 6.40 | 14.00 | 36.70 |
| C V (%) | 6.66 | 4.48 | 3.20 | 6.41 | 5.10 | 3.80 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 86-99 | 91 |
| EDTA plasma (n=8) | 95-111 | 101 |
| Cell culture media (n=8) | 92-108 | 98 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
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