在免疫学功能评价、疫苗效果评估及肿瘤微环境研究中,通过流式细胞术检测T细胞分泌的细胞因子(如IFN-γ、IL-4、IL-17A等)是判断Th1/Th2/Th17分化及细胞毒性T细胞活化的核心指标。然而,离体状态下淋巴细胞处于静息期,若不施加有效的刺激信号,胞内细胞因子表达极低,难以获得可靠的流式结果。
Elabscience® Cell Stimulation MIX Kit(细胞因子激活剂,货号:E-CK-A019) 是一款即用型、优化的细胞刺激混合物,专为流式胞内染色(ICS)实验设计。它能够快速、高效地激活人及小鼠T淋巴细胞,诱导其合成并蓄积目标细胞因子,配合蛋白转运抑制剂使用,即可获得清晰、高分辨率的流式检测数据。
本品含有佛波酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin) 的友好比例混合物,通过协同激活蛋白激酶C(PKC)和提升胞内钙离子浓度,模拟TCR/CD3复合物信号,强力触发T细胞增殖和细胞因子基因转录。相较于传统自配试剂,本产品:
批次间差异极小:标准化生产,避免了实验室自行配制时溶剂挥发、称量误差导致的活性波动。
即取即用:无需溶解、分装和滴定,直接加入培养体系,大幅缩短实验准备时间。
兼容性强:可与人外周血单个核细胞(PBMCs)、小鼠脾细胞、淋巴结细胞等多种样本良好适配。
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根据产品质控数据,当人外周血淋巴细胞与Cell Stimulation MIX及Protein Transport Inhibitor MIX共孵育5小时,随后固定、破膜并进行CD3 FITC、IFN-γ PE和IL-4 APC染色,流式散点图清晰显示CD3+ T细胞群体中IFN-γ+(Th1)和IL-4+(Th2)双阳性亚群显著分群,背景信号极低。
同样,小鼠脾细胞经过相同处理后,CD3 APC与IFN-γ FITC染色亦呈现出明显的IFN-γ+细胞群,表明该刺激剂在跨物种应用中均能保持高度有效性。仅需5小时短时孵育,即可获得足够强度的胞内染色信号,较传统过夜刺激更省时、细胞存活率更高。
截至目前,该产品已发表于国际主流学术期刊,相关研究成果涵盖了心血管疾病及感染免疫领域:
心肌缺血再灌注损伤研究(BBA - Molecular Basis of Disease, 2026, IF: 4.2):研究团队利用本产品刺激小鼠心脏浸润的CD4+ T细胞,结合蛋白转运抑制剂,成功检测到Th17细胞分泌的IL-17A,为达格列净通过调控RORγt改善心衰提供了关键的细胞功能学证据。
疟疾感染中Breg分化机制(International Immunopharmacology, 2025, IF: 4.7):在该研究中,Cell Stimulation MIX被用于刺激脾脏淋巴细胞,通过流式检测IL-35+调节性B细胞(Breg)的分化情况,揭示了STING–IRF3信号轴在疟疾免疫调节中的新作用。
为满足不同通量需求,提供50 Assays和500 Assays两种规格。请于 -20°C避光条件下保存,有效期为12个月。运输采用冰袋冷链,确保各组分活性稳定。使用前请wan全解冻并充分混匀,避免反复冻融。
最佳搭档:推荐与Protein Transport Inhibitor MIX(货号:E-CK-A013) 联合使用,在刺激同时阻断细胞因子分泌,使胞内蓄积量达到峰值。
刺激时间:建议总刺激时间为4~6小时,过长可能导致细胞活力下降,过短则积累不足。对于特定弱应答样本,可适当延长至8小时。
对照设置:务必设置未刺激对照组(仅加转运抑制剂)以评估背景水平,以及阳性对照(如CD3/CD28磁珠)以验证系统有效性。
如果您正在寻找一款经过文献验证、操作简便且刺激高效的细胞活化工具,Elabscience Cell Stimulation MIX Kit将是您提升胞内细胞因子检测数据质量和实验重复性的理想选择。
参考文献:
1、Dapagliflozin targets RORγt to improve myocardial ischemia-reperfusion injury-induced heart failure by regulating the CD4+ T cell/Th17 cell axis within cardiac tissue
IF: 4.200
Journal: BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR BASIS OF DISEASE (2026)
DOI:10.1016/j.bbadis.2026.168185
Reactivity:Mouse
2、Distinct STING–IRF3 activation determines IL-35+ Breg differentiation in rodent malaria
IF: 4.700
Journal: INTERNATIONAL IMMUNOPHARMACOLOGY (2025)
DOI:10.1016/j.intimp.2025.115310
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